Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| AGATCT | A↑GATCT |
| TCTAGA | TCTAG↓A |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген BglII из Bacillus globigii
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 100 | 25 | 10 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Не блокируется dam-метилированием при перекрывании (GmATC): AGATCTС ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Для фасовок Turbo (E027T и E028T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:Литература:
Duncan, C.H., Wilson, G.A. and Young, F.E. J. Bacteriol. 134: 338-344 (1978).
В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27.
