Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| G(mA)TC | G(mA)↑TC |
| CT(mA)G | CT↓(mA)G |
Источник: Из штамма E.Coli, несущего клонированный ген Mal из Marinococus albus I.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК pBR322 (dam-метилированной) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
pBR322 ДНК (dam-methylated)
Оптимальный буфер: SE-буфер MalI
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 25 | 25 | 50 | 75 | 50 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA, 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 20% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Фермент расщепляет только метилированную ДНК.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер MalI
Примечание:
Литература:
