Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| AGGCCT | AGG↑CCT |
| TCCGGA | TCC↓GGA |
Источник: Planococcus citreus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 75 | 50 | 25 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 50°С
Чувствительность к метилированию: Не блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG): AGGCCTGG
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E105T и E106T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:
При температуре 37°С активность 50% от максимальной.
Литература:
Гончар Д.А., Шинкаренко Н.M., Дедков В.С., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2001).
