Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCGATCGC | GCGAT↑CGC |
CGCTAGCG | CGC↓TAGCG |
Источник: Rhizoblum galegae
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК Аденовируса-2 за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК Аденовируса-2
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B | G | O | W | Y | ROSE |
75 | 50 | 10 | 25 | 100 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl;0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов Ad2 ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированию: Не блокируется dam-метилированием при перекрывании (GmATC): GCGATCGC
Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Примечание:
Фермент обладает звездчатой активностью.
Литература: