Описание
Сайт узнавания:
| GGTGA(N)8↑ |
| CCACT(N)7↓ |
Источник: Actinobacillus suis HP
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (dam-)
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 50 | 100 | 75 | 25 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 30% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется dam-метилированием при перекрывании (GmATC): GGTGATC
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Примечание:
Фермент также может гидролизовать ДНК в положении 9/8 в зависимости от последовательности между сайтомузнавания и местом расщепления.
Литература:
Дедков В.С., Дегтярев С.Х. Биол.Хим. 379: 573-574 (1998).
Дегтярев С.Х., Колыхалов А.А., Речкунова Н.И., Дедков В.С., Жилкин П.А. BsiI — новая необычная эндонуклеаза рестрикции. // Молекулярная биология, т.24, Вып. 1, 244-247 (1990).
Репин В.Е., Польшина С.В., Божко Н.А., Дегтярев С.Х. Культивирование Bacillus species 21 — продуцента эндонуклеазы рестрикции Bse21I. // Извести СО АН СССР, Серия биологических наук, вып.1, 108-111 (1989).
