Описание
Сайт узнавания:
| CCGC↑GG |
| GG↓CGCC |
Источник: Streptomyces fradiae 303
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 50 | 10 | 10 | 75 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Литература:
Пучкова Л.И., Селина A.В., Серов Г.Д., Кривопалова Г.Н., Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х., Неопубликованные данные.
Дегтярев С.Х., Репин В.Е., Речкунова Н.И., Чижиков В.Е., Малыгин Э.Г., Михайлов В.В., Рассказов В.А. Определение субстратной специфичности эндонуклеазы рестрикции VspI. // Биоорганическая химия, Т.13, № 3, 420-421 (1987).
