Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCTGCAGG | CCTGCA↑GG |
| GGACGTCC | GG↓ACGTCC |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sbf I из Streptomyces species Bf61
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 50 | 100 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются T4 ДНК-лигазой и 90% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Абдурашитов M.A., Килева E.В., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1994).
