Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
Источник: Exiguobacterium mexicanum 6
Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 37°С за 1 час.
Субстрат для определения активности: λ-ДНК
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75-100 | 50-75 | 25-50 | 25-50 | 100 | 25 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин; Хранить при -20°С
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг λ-ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. После инкубации 5 ед фермента в течение 3 часов неспецифического гидролиза одно и двуцепочечного олигонуклеотидов не наблюдается.
С ферментом поставляется: 10 x SE-Буфер Y
Публикации:
- М.А. Абдурашитов, Д.А. Гончар, В.А. Чернухин, В.С. Дедков, Н.А. Михненкова, А.А. Никонова, С.Х. Дегтярёв Эндонуклеаза рестрикции EmiI, изошизомер Ksp632I, узнает непалиндромную последовательность ДНК 5’-CTCTTC(1/4)-3’ // ДНК-узнающие ферменты, том 2025(4)
