Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CATG | ↑CATG |
| GTAC | GTAC↓ |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Fat I из Flavobacterium aquatile NL3
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг pUC19 ДНК за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
pUC19 ДНК
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 100 | 25 | 10 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 3 ед фермента в течение 16 часов при 55°С
Чувствительность к метилированию: Блокируется метилированием mCATG
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G.
Примечание:
Литература:
В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46
B.C. Дедков, Е.В. Килёва Д.В. Попиченко, С.Х. Дегтярев Эндонуклеаза рестрикции FatI из Flavobacterium aquatile NL3 расщепляет ДНК по сайту 5′-^CATG – 3′ // Биотехнология, 2002, №5, С.3-7.
