Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GDGCHC | GDGCH↑C |
| CHCGDG | C↓HCGDG |
Источник: Micrococcus halobius SD
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер W
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 75 | 100 | 10 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W.
Примечание:
Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
Литература:
Шаповалова M.A., Абдурашитов M.A., Дедков В.С., Каширина Ю.Г., Попиченко Д.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (2000).
