Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| ACCGGT | A↑CCGGT |
| TGGCCA | TGGCC↓A |
Источник: Arthrobacter species G
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 10 | 25 | 100 | 75 | 10 | 75 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Для фасовок Turbo (E235T и E236T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:Литература:
Чмуж Е.В.,Михненкова Н.А., Наякшина Т.Н., Мезенцева Н.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х. Нопубликованные данные (2005)
