Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GCGATCGC | GCGAT↑CGC |
| CGCTAGCG | CGC↓TAGCG |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген AsiSI из Arthrobacter species S
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК Аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК Аденовируса-2
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 100 | 75 | 10 | 25 | 25 |
Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Не блокируется dam-метилированием при перекрывании (GmATC): GCGATCGC
Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Примечание:
Фермент обладает звездчатой активностью.
Литература:
Абдурашитов М.А., Шинкаренко Н.M., Шевченко A.В., Дедков В.С., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные. 2000
