Описание
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| GAAGA(N)8 | GAAGA(N)8↑ |
| CTTCT(N)7 | CTTCT(N)7↓ |
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Mbo II из Moraxella bovis
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (dam-)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 75 | 75 | 25 | 50 | 100 | 50 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 60% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Сшивка более эффективна в присутствии 10% ПЭГ.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dam-метилированием (GmATC): GAAGATC.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Примечание:
Литература:
Brown N.L., Hutchison C.A. III, Smith M. J. Mol. Biol. 140: 143-148 (1980).
