Описание
Применение:
Предназначен для изучения метилирования ДНК. Позволяет определить наличие сайтов R(5mC)GY в заданной точке ДНК человека. Набор рассчитан на 200 реакций. Включает 1, 3 или 5 гибридных праймеров по выбору заказчика, либо полный набор из 32 гибридных праймеров (HP). При оформлении заказа, пожалуйста, выберите необходимые вам гибридные праймеры. Их структура приведена в Инструкции по применению
Состав:
- 1X TE буфер — 200 мкл
- 10Х SE TMN Буфер — 160 мкл
- ДМСО — 80 мкл
- БСА, 10 мг/мл — 70 мкл
- MD-эндонуклеаза (20 е.а./мкл) — 10 мкл
- Универсальный адаптер, двухцепочечный (10 μM) — 110 мкл
- АТФ, 10 mM — 110 мкл
- Т4 ДНК лигаза (200 е.а./мкл) — 100 мкл
- 10X SE GLAD буфер — 430 мкл
- MgCl2, 50 mM — 120 мкл
- Смесь dNTP, 10 mM каждый — 90 мкл
- SP Taq ДНК Полимераза, 5 е.а./мкл — 40 мкл
- Контрольная ДНК Raji, 18 нг/мкл — 10 мкл
- Контрольная ДНК HeLa, 18 нг/мкл — 10 мкл
- Контрольная ДНК фага Lambda, 18 нг/мкл — 25 мкл
- Контрольня смесь для URB1 (праймеры и флюоресцентный зонд), 10 μM каждый — 40 мкл
- Контрольня смесь для CEBPD (праймеры и флюоресцентный зонд), 10 μM каждый — 15 мкл
- В состав включены 1, 3 или 5 гибридных праймеров по выбору заказчика, либо полный набор из 32 гибридных праймеров в концентрации 20 μM и количестве 170 мкл каждый. Последовательности 32 гибридных праймеров приведены в Инструкции по применению
Условия хранения: Хранить при -20°C
Примечание:
Для проведения GLAD ПЦР анализа в реакционную смесь на стадии ПЦР необходимо добавить геномный праймер, зонд, а также один из гибридных праймеров.
Геномный праймер и зонд могут быть синтезированы по дополнительному заказу.
Литература:
1. A.G. Akishev et al.»GLAD-PCR assay of selected R(5mC)GY sites in URB1 and CEPBD genes in human genome» // Res J Pharm Biol Chem Sci, 8(1), 2017
2.GLAD-PCR Assay of DNA Methylation Markers Associated with Colorectal Cancer // Evdokimov et al.,Biol Med (Aligarh) 2016, 8:7
3.Инструкция по применению набора для GLAD-ПЦР-анализа
4.Демонстрация GLAD-ПЦР-анализа на контрольных ДНК
