Description
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
| CCNGG | CC↑NGG |
| GGNCC | GGN↓CC |
Источник: Micrococcus species R9
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности:
ДНК фага лямбда (dcm-)
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
| B | G | O | W | Y | ROSE |
| 50 | 50 | 100 | 50 | 50 | 100 |
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA; 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента <5% фрагментов ДНК сшиваются и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG): CCWGG.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Примечание:
Литература:
Репин В.E., Андреева И.С., Килева E.В., Шевченко A.В., Абдурашитов M.A., Репин M.В., Дегтярев С.Х. Прикл. Биохим. Микробиол. 33: 284-286 (1997).
