| Название фермента | Taq ДНК полимераза | SP-Taq ДНК полимераза | Taq SE ДНК полимераза | PfuSE ДНК полимераза | «Hot Start Taq» ДНК полимераза |
| SE каталожный номер | E331, E332 | E333, E334 | E313, E314 | E363, E364 | E351, E352 |
| Полимеразная активность 5′→3′ | + | + | + | + | + |
| Экзонуклеазная активность 5′→3′ | + | + | + | – | + |
| Экзонуклеазная активность 3′→5′ | – | – | + | + | – |
| Рекомендуемая максимальная длина продукта (тыс.пар нуклеотидов) | 6 | 6 | 15 | 3 | 6 |
| 3′ концы продукта – тупые или на один нуклеотид( dA ) выступающие | смесь | смесь | смесь | >90% тупых | смесь |
| Время элонгации (в минутах ) для продукта длиной 1 тыс.пар нуклеотидов | 1 мин. | 1 мин. | 1 мин. | 2 мин. | 1 мин. |
| Концентрация праймеров, μM | 0.1 | 0.1 | 0.2 | 0.5 | 0.1 |
| Концентрация dNTP , μM | 50 | 50 | 200 | 200 | 50 |
| Температура реакционной смеси при приготовлении, °С | 10 | 10 | 0 | 0 | комнатная |
| Оптимальное количество фермента на 50 мкл реакционной смеси | 1 ед.акт | 1 ед.акт | 1 ед.акт | 2.5 ед.акт | 1 ед.акт |
| Краткая характеристика | стандарт | повышенная специфичность | длинные продукты | высокая точность | высокая специфичность |
Примеры использования ДНК-полимераз производства SibEnzyme
Геномная ДНК человека, клеточная линия Raji, фрагмент 0.3 кb
Праймеры:
5′ GGAATTTAACAGACAGAAAGGCGCAC 3′ (26)
5′ CAGCAGCCCTGCAAAAGCAGAC 3′ (22)
Дорожки
1 – маркер 100bp
2 –Taq полимераза
3 -TaqSE полимераза
4 – SPTaq полимераза
5 – PfuSE полимераза
6 – HotStart Taq полимераза
7 – маркер 100bp
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 95,0°C for 3:00
2: 95,0°C for 0:10
3: 66,0°C for 0:20
4: 72,0°C for 0:15
5: GOTO 2, 44 more times
6: 72,0°C for 0:30
Геномная ДНК человека, клеточная линия Raji, фрагмент 0.5 кb
Праймеры:
5′ CCACCTCGGCCTCCCCAA 3′(18)
5′ AGTTGAGGAATGCACCAGGTCAGC 3′(24)
Дорожки
1 – маркер 100bp
2 –Taq полимераза
3 -TaqSE полимераза
4 – SPTaq полимераза
5 – PfuSE полимераза
6 – HotStart Taq полимераза
7 – маркер 100bp
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 95,0°C for 3:00
2: 95,0°C for 0:10
3: 68,0°C for 0:20
4: 72,0°C for 0:30
5: GOTO 2, 44 more times
6: 72,0°C for 1:00
Геномная ДНК человека, клеточная линия Raji, фрагмент 1 кb
Праймеры:
5′ GCGGGGGCTGCGGGAGGA 3′(18)
5′ GCCGCGGCCAGGGACGAA 3′(18)
Дорожки
1 – маркер 1kb
2 – Taq полимераза
3 – TaqSE полимераза
4 – SPTaq полимераза
5 – PfuSE полимераза
6 – HotStart Taq полимераза
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 95,0°C for 3:00
2: 95,0°C for 0:10
3: 68,0°C for 0:20
4: 72,0°C for 0:30
5: GOTO 2, 44 more times
6: 72,0°C for 1:00
Геномная ДНК человека, клеточная линия Raji, фрагмент 2 кb
Праймеры:
909d 5′ GCGGGGGCTGCGGGAGGA 3′(18)
2933r 5′ CGCCACGCCACGCCCATCC 3′(19)
Дорожки
1 – маркер 1kb
2 – Taq полимераза
3 – TaqSE полимераза
4 – SPTaq полимераза
5 – PfuSE полимераза
6 – HotStart Taq полимераза
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 95,0°C for 3:00
2: 95,0°C for 0:10
3: 68,0°C for 0:20
4: 72,0°C for 0:30
5: GOTO 2, 44 more times
6: 72,0°C for 1:00
ДНК фага λ, фрагмент 2 kb
Праймеры:
5’ GCTATGCCGCCAACGCCATCC 3’(21)
5’ CATCCACCTTATGGCTGCCGCTGT 3’(24)
Дорожки
1 – Taq полимераза
2 – TaqSE полимераза
3 – SPTaq полимераза
4 – PfuSE полимераза
5 – HotStart Taq полимераза
6 – маркер 1 kb
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 95,0°C for 3:00
2: 95,0°C for 0:10
3: 64,0°C for 0:15
4: 72,0°C for 4:00
5: GOTO 2, 44 more times
6: 72,0°C for 1:00
ДНК фага Т7, фрагмент 5 kb
Праймеры:
5′ CTCGCAAGTCTCGCCGTA 3′ (18)
5′ AACGGCAGCAGCATAAGC 3′ (18)
Дорожки
1 – маркер 1kb
2 – SPTaq полимераза
3 – Taq полимераза
4 – HotStart Taq полимераза
5 – TaqSE полимераза
6 – PfuSE полимераза
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 94,0°C for 3:00
2: 94,0°C for 0:10
3: 63,0°C for 0:10
4: 68,0°C for 8:00
5: GOTO 2, 44 more times
6: 68,0°C for 2:00
ДНК фага Т7, фрагмент 15.1 kb
Праймеры:
5′ CTCGCAAGTCTCGCCGTA 3′(18)
5′ CGCATTGTCTCGCCTTCA 3′(18)
Дорожки
1 – маркер λ/BglI
2 – Taq полимераза
3 – SPTaq полимераза
4 – HotStart Taq полимераза
5 – TaqSE полимераза
6 – PfuSE полимераза
Реакцию проводили при помощи набора К002 «для ПЦР с Taq ДНК-полимеразой и буфером AS»
Термоциклирование на BIO-RAD CFX
1: 94,0°C for 2:00
2: 94,0°C for 0:05
3: 63,0°C for 0:10
4: 68,0°C for 20:00
5: GOTO 2, 44 more times
6: 68,0°C for 5:00