База данных эндонуклеаз рестрикции и метилзависимых ДНК эндонуклеаз производства SibEnzyme

Список ферментов

Acu I

Название фермента Acu I
Прототип Eco57I
Артикул SE-E451
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… CTGAAG(N)16▼ …3'
3'… GACTTC(N)14▲ …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Acu I из Acinetobacter calcoaceticus SRW4
Оптимальный буфер SE-буфер Y + SAM
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
2550507510050
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 1 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер Y, BSA, SAM
Примечания Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл и SAM до концентрации 10мкМ. Допустимо использовать SAM в конечной концентрации 10-64 мкМ, т.е. 32 мМ штоковый раствор необходимо разбавлять в 3200-500 раз. Если объем реакционной смеси минимальный, например 10-20 мкл, то штоковый раствор SAM можно предварительно разбавить 5 мМ раствором H 2 SO 4 или водой, хранить при -20°C. При длительной инкубации BSA использовать не рекомендуется. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Дегтярев С.Х., Килева E.В., Дедков В.С. Неопубликованные данные (2001).

Поиск по названию

Acu I

Название фермента Acu I
Прототип Eco57I
Артикул SE-E451
Вариант Turbo Отсутствует
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… CTGAAG(N)16▼ …3'
3'… GACTTC(N)14▲ …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Acu I из Acinetobacter calcoaceticus SRW4
Оптимальный буфер SE-буфер Y + SAM
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
2550507510050
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 80% из них могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 1 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер Y, BSA, SAM
Примечания Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл и SAM до концентрации 10мкМ. Допустимо использовать SAM в конечной концентрации 10-64 мкМ, т.е. 32 мМ штоковый раствор необходимо разбавлять в 3200-500 раз. Если объем реакционной смеси минимальный, например 10-20 мкл, то штоковый раствор SAM можно предварительно разбавить 5 мМ раствором H 2 SO 4 или водой, хранить при -20°C. При длительной инкубации BSA использовать не рекомендуется. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Дегтярев С.Х., Килева E.В., Дедков В.С. Неопубликованные данные (2001).