База данных эндонуклеаз рестрикции и метилзависимых ДНК эндонуклеаз производства SibEnzyme

HspA I

Название фермента HspA I
Прототип HhaI
Артикул SE-E069
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… GCGC …3'
3'… CGCG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген HspAI из Haemophilus species A1
Оптимальный буфер SE-буфер Y
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
50502525100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием 5`-G(5mC)GC-3`/3`-CG(5mC)G-5` Гидролизует полуметилированный по первому цитозину сайт 5`-G(5mC)GC-3`/3`-CGCG-5` Не блокируется при метилировании 5`-GCG(5mC)-3`/3`-(5mC)GCG-5` и 5`-GCG(5mC)-3`/3`-CGCG-5`
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания
Литература
  1. Речкунова Н.И., Приходько E.A., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные(1994). В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27. В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46

HspA I

Название фермента HspA I
Прототип HhaI
Артикул SE-E069
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… GCGC …3'
3'… CGCG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген HspAI из Haemophilus species A1
Оптимальный буфер SE-буфер Y
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
50502525100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется CG метилированием 5`-G(5mC)GC-3`/3`-CG(5mC)G-5` Гидролизует полуметилированный по первому цитозину сайт 5`-G(5mC)GC-3`/3`-CGCG-5` Не блокируется при метилировании 5`-GCG(5mC)-3`/3`-(5mC)GCG-5` и 5`-GCG(5mC)-3`/3`-CGCG-5`
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания
Литература
  1. Речкунова Н.И., Приходько E.A., Шевченко A.В., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные(1994). В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27. В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК крысы in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2006, т. 2, №3, с. 39-46