База данных эндонуклеаз рестрикции и метилзависимых ДНК эндонуклеаз производства SibEnzyme

EcoR V

Название фермента EcoR V
Прототип EcoRV
Артикул SE-E059
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… GATATC …3'
3'… CTATAG …5'
Источник Из штамма Е.coli несущего клонированный ген EcoRV из Escherichia coli
Оптимальный буфер SE-буфер W
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
025501002550
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин;Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер W, BSA (кроме E059T и E060T). Для фасовок Turbo (E059T и E060T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Холмина В., Ребентиш Б.A., Скоблов Ю.С., и др. Докл. Акад. Наук СССР 253: 495-497 (1980). В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27.

EcoR V

Название фермента EcoR V
Прототип EcoRV
Артикул SE-E059
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… GATATC …3'
3'… CTATAG …5'
Источник Из штамма Е.coli несущего клонированный ген EcoRV из Escherichia coli
Оптимальный буфер SE-буфер W
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 80 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
025501002550
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин;Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер W, BSA (кроме E059T и E060T). Для фасовок Turbo (E059T и E060T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Холмина В., Ребентиш Б.A., Скоблов Ю.С., и др. Докл. Акад. Наук СССР 253: 495-497 (1980). В.А. Чернухин, М.А. Абдурашитов, В.Н. Томилов, Д.А. Гончар, С.Х. Дегтярев Сравнительный рестрикционный анализ хромосомной ДНК мыши in vitro и in silico // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова, 2007, 3, №4, с. 19-27.