База данных эндонуклеаз рестрикции и метилзависимых ДНК эндонуклеаз производства SibEnzyme

FauND I

Название фермента FauND I
Прототип NdeI
Артикул SE-E009
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… CATATG …3'
3'… GTATAC …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген FauND I из Flavobacterium aquatili ND
Оптимальный буфер SE-буфер Y
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
50751050100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% PEG сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер Y, BSA (кроме E009T и E010T). Для фасовок Turbo (E009T и E010T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Фермент чувствителен к примесям в некоторых ДНК. Например, ДНК очищенная по стандартному минипрепаративному протоколу гидролизуется плохо. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Шевченко A.В., Беличенко O.A., Мякишева T.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1995). Абдурашитов М. А, Чернухин В. А., Томилов В. Н., Гончар Д. А., Дегтярев С. Х. Рестрикционный анализ ДНК человека – новые возможности в ДНК-диагностике // Медицинская генетика, Т.6, № 8, с 29-36, 2007

FauND I

Название фермента FauND I
Прототип NdeI
Артикул SE-E009
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… CATATG …3'
3'… GTATAC …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген FauND I из Flavobacterium aquatili ND
Оптимальный буфер SE-буфер Y
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
50751050100100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% PEG сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер Y, BSA (кроме E009T и E010T). Для фасовок Turbo (E009T и E010T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Фермент чувствителен к примесям в некоторых ДНК. Например, ДНК очищенная по стандартному минипрепаративному протоколу гидролизуется плохо. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Шевченко A.В., Беличенко O.A., Мякишева T.В., Дедков В.С., Абдурашитов M.A., Дегтярев С.Х. Неопубликованные данные (1995). Абдурашитов М. А, Чернухин В. А., Томилов В. Н., Гончар Д. А., Дегтярев С. Х. Рестрикционный анализ ДНК человека – новые возможности в ДНК-диагностике // Медицинская генетика, Т.6, № 8, с 29-36, 2007