База данных эндонуклеаз рестрикции и метилзависимых ДНК эндонуклеаз производства SibEnzyme

Sph I

Название фермента Sph I
Прототип SphI
Артикул SE-E129
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… GCATGC …3'
3'… CGTACG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sph I из Streptomyces phaeochromogenes
Оптимальный буфер SE-буфер G
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25100757550100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер G, BSA (кроме E129T и E130T). Для фасовок Turbo (E129T и E130T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Fuchs, L.Y., Covarrubias, L., Escalante, L., Sanchez, S., Bolivar, F. Gene 10:39-46 (1980).

Sph I

Название фермента Sph I
Прототип SphI
Артикул SE-E129
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Отсутствует
Сайт узнавания
5'… GCATGC …3'
3'… CGTACG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sph I из Streptomyces phaeochromogenes
Оптимальный буфер SE-буфер G
Оптимальная температура 37 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
25100757550100
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага лямбда
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию не проверялось
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер G, BSA (кроме E129T и E130T). Для фасовок Turbo (E129T и E130T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечания Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Fuchs, L.Y., Covarrubias, L., Escalante, L., Sanchez, S., Bolivar, F. Gene 10:39-46 (1980).