База данных эндонуклеаз рестрикции и метилзависимых ДНК эндонуклеаз производства SibEnzyme

Sfi I

Название фермента Sfi I
Прототип SfiI
Артикул SE-E123
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Доступна
Сайт узнавания
5'… GGCCNNNNNGGCC …3'
3'… CCGGNNNNNCCGG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sfi I из Streptomyces fimbriatus
Оптимальный буфер SE-буфер G
Оптимальная температура 50 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
7510025252575
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага Т7
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 50°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется при перекрывании dcm метилированием (C m CWGG) GG CCWGG NNNGGCC.Не блокируется при перекрывании dcm метилированием (C m CWGG) GGCCNNNNNNGG CCWGG.
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер G, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания При 37°C активность 75%-100% от максимальной. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Qiang, B.-Q., Schildkraut, I. Nucleic Acids Res. 12: 4507-4515 (1984). В. С. Дедков, С.Х. Дегтярев Определение эндонуклеаз рестрикции в колониях микроорганизмов Streptomyces и Nocardia // Прикладная биохимия и микробиология Том 28, 1992, №. 2, 309- 313

Sfi I

Название фермента Sfi I
Прототип SfiI
Артикул SE-E123
Вариант Turbo Доступен
Высококонцентрированная версия Доступна
Сайт узнавания
5'… GGCCNNNNNGGCC …3'
3'… CCGGNNNNNCCGG …5'
Источник Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sfi I из Streptomyces fimbriatus
Оптимальный буфер SE-буфер G
Оптимальная температура 50 °C
Температура инактивации 65 °C
Активность в буферах
BGOWYROSE
7510025252575
Определение единицы активности За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Тестируемая ДНК ДНК фага Т7
Условия хранения 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 50°С.
Чувствительность к метилированию Блокируется при перекрывании dcm метилированием (C m CWGG) GG CCWGG NNNGGCC.Не блокируется при перекрывании dcm метилированием (C m CWGG) GGCCNNNNNNGG CCWGG.
Поставляется с ферментом 10 Х SE-буфер G, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечания При 37°C активность 75%-100% от максимальной. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Литература
  1. Qiang, B.-Q., Schildkraut, I. Nucleic Acids Res. 12: 4507-4515 (1984). В. С. Дедков, С.Х. Дегтярев Определение эндонуклеаз рестрикции в колониях микроорганизмов Streptomyces и Nocardia // Прикладная биохимия и микробиология Том 28, 1992, №. 2, 309- 313